编号：CYYJ01045

篇名：二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白4表达研究

作者： 郝小惠 郭志义 张芳 刘嘉祺 孙悦 刘和亮

关键词： 水通道蛋白-1 二氧化硅 A549细胞 肺上皮细胞 矽肺

机构： 华北理工大学医学实验研究中心 河北063000 华北理工大学临床医学院 河北063000 华北理工大学基础医学院 河北063000

摘要： [目的]研究二氧化硅（Si O2）粉尘刺激对人肺泡上皮A549细胞水通道蛋白-1（AQP-1）的表达及意义。[方法]将A549细胞分为对照组、染毒组及抑制剂组。其中染毒组细胞利用50 mg/L的Si O2混悬液刺激细胞,Si O2分别刺激0.5、1、2、4、8 h后检测m RNA表达;Si O2分别刺激3、6、12、24 h后检测蛋白表达。抑制剂组则先加入AQP-1特异性的通道抑制剂氯化汞（Hg Cl2）孵育3 min后再加Si O2刺激2 h检测m RNA,刺激6 h检测蛋白表达。各组采用实时聚合酶链反应法检测AQP-1 m RNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测AQP-1蛋白表达水平。[结果]AQP-1m RNA表达：与对照组相比,Si O2刺激后的0.5、1、2、4 h A549细胞AQP-1 m RNA的表达量分别是对照组的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8 h时回到对照组水平（P〈0.01）;抑制剂组的表达水平为相同刺激时间Si O2染毒组的65%。AQP-1蛋白表达：1免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.44、2.56、1.93、1.35倍（P〈0.05或P〈0.01）;抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其70%（P〈0.01）。2免疫细胞化学结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.17、1.49、1.29、1.07倍（P〈0.05或P〈0.01）。抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其71%（P〈0.01）。[结论]Si O2刺激使A549细胞的AQP-1表达增高,其特异性抑制剂氯化汞可抑制Si O2刺激引起的AQP-1的表达增高,推测AQP-1可能参与了矽肺的发生发展过程。