硅纳米载体携带RNA干扰质粒逆转人结肠癌细胞多药耐药的实验研究

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2014-04-22

编号:YYHY00149

篇名:硅纳米载体携带RNA干扰质粒逆转人结肠癌细胞多药耐药的实验研究

作者: 姜习新; 杨昊; 杨毅

关键词: 硅纳米; 多药耐药相关蛋白基因; 小RNA分子

机构: 湖南省岳阳市二人民医院

摘要: 目的探讨硅纳米颗粒作为基因转染载体携带干扰质粒MRP2siRNA逆转人结肠癌耐药细胞株HT29/LOHP的多药耐药,为硅纳米作为靶向基因治疗和化疗药物的有效性打下基础。方法制备硅纳米载体,用硅纳米载体和脂质体分别将多药耐药基因MRP2的干扰重组质粒pGensil-MRP2siRNA,转染人结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP,观察两种载体转染人结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP后绿色荧光的表达,利用RT-PCR和Western-blot检测MRP2的表达,CCK-8实验测定转染干扰质粒后顺铂对人结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP细胞增殖抑制作用,并比较两种载体的逆转效率。结果在人结肠癌耐药细胞株HT29/L-OHP中,两种载体携带的siRNA都明显抑制了MRP2 mRNA及蛋白的表达,两种载体逆转效果差异无统计学意义(P>0.05)。在相同浓度化疗药物的作用下,两种载体的RNA干扰组细胞凋亡比例显著高于对照组(P<0.01),表明细胞耐药性显著下降,两种载体细胞凋亡差异无统计学意义(P>0.05)。结论硅纳米能有效的携带pGensil-MRP2siRNA质粒转染人结肠癌细胞人结肠癌耐药细胞株HT29/LOHP,并且对结肠癌耐药细胞的MRP2的表达有明显抑制作用,取得良好的逆转耐药效果。

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