编号：YYHY00421

篇名：骨桥蛋白靶向磁性纳米探针对动脉斑块的分子成像

作者： 乔红玉[1] ;王亚斌[2] ;高磊[2] ;徐斌[2] ;江振华[1] ;梁潇[3] ;田捷[3] ;曹丰[1,2]

关键词： 动脉粥样硬化斑块 纳米颗粒 骨桥蛋白 分子影像

机构： [1]第四军医大学西京医院心内科,西安710032; [2]解放军总医院心内科,北京100853; [3]中国科学院自动化研究所,北京100190

摘要： 目的通过构建新型骨桥蛋白（OPN）靶向的四氧化三铁（Fe2O4）纳米颗粒，实现对动脉粥样硬化斑块中平滑肌增殖的荧光成像。方法通过-COOH和-NH2之间的脱水缩合反应将OPN抗体偶联至DMSA修饰的Fe3O4纳米颗粒表面，进而将荧光染料NHS-Cy5．5连接获得纳米成像探针。通过噻唑蓝（MTT）和TUNEL方法检测探针对巨噬细胞的毒性。动脉粥样硬化动物模型通过高脂喂养ApoE^-/-小鼠20周构建成功，继而将探针（5mgFe／kg）经小鼠尾静脉注射，24h后用小动物活体成像仪系统进行光学三维成像，离体血管的冰冻切片做Cy5．5的激光共聚焦检测。结果MTT结果显示，加不同浓度探针孵育：0，5，10，15，20，25，30mg／L相较于对照组来说，细胞活性并未表现出差异阻490nm：（1．10±0．03），（1．05±0．03），（1．03±0．02），（0．96±0．02），（0．96±0．03），（0．93±0．03）vs（1．11±0．05），P〉0．05]；TUNEL结果显示，加不同浓度的探针孵育：0，10，20，25，30mg／L与对照组比较来说，细胞凋亡率差异无统计学意义[（21．2±1．5）％，（21．8±1．1）％，（21．5±1．2）％，（22．3±1．2）％vs（20．5±1．0）％，P〉0．05]，证实探针在我们所运用浓度范围内对细胞几乎是无毒性的。探针经尾静脉注射到动脉粥样硬化模型小鼠体内后，24h光学成像可见颈部有明显的信号，且组织切片的激光共聚焦结果显示，探针主要集中在斑块内，HE染色结果进一步显示斑块的性质。结论本实验所构建的探针在所使用浓度范围内基本无任何明显毒性，且对动物颈部动脉粥样硬化斑块有较好的识别效果。