编号：YYHY00480

篇名：携载G250单克隆抗体的纳米微泡靶向于肾细胞癌的体内外实验研究

作者： 阳孟君[1] ;王洛夫[1] ;郭燕丽[2] ;范校周[2] ;钟华[2] ;兰卫华[1] ;江军[1] ;张克勤[1]

关键词： 纳米微泡 超声增强显影技术 肾细胞癌 单克隆抗体

机构： [1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆400042; [2]第三军医大学西南医院超声科,重庆400038

摘要： 目的本研究拟制备携载G250单克隆抗体的纳米微泡,在体内和体外研究其对肾细胞癌的靶向性。方法机械振荡法制备空白脂质纳米微泡并观察其稳定性,生物素-亲和素连接技术将纳米微泡与G250单克隆抗体相连,采用免疫荧光进行验证。细胞免疫荧光实验鉴定所使用的两种肾细胞癌细胞（786-O和ACHN细胞）中G250的表达情况,靶向结合实验鉴别靶向纳米微泡对786-O和ACHN两种肾细胞癌细胞的体外寻靶能力。在肾细胞癌的裸鼠皮下移植瘤模型中,使用纳米微泡进行超声造影,并将采集到的动态图像在定量分析软件Qlab 8.1中进行数据分析。结果成功制备了平均粒径为404.9 nm空白纳米微泡和平均粒径为611.4 nm靶向纳米微泡,稳定性能好,同时免疫荧光证实了靶向纳米微泡构建成功,能够与FITC标记的二抗结合,从而显示出绿色荧光;细胞免疫荧光证实G250抗原在786-O细胞中呈膜表达,而ACHN细胞中不表达。在细胞结合实验中发现靶向纳米微泡能够特异性的结合786-O细胞,但不能结合于ACHN细胞。体内超声造影显像从平均值和最大值分析,靶向纳米微泡和空白微泡在786-O肾细胞癌细胞的裸鼠模型的显影效果存在显著差异[平均值：（11.74±0.52）vs（16.34±0.40）,P=0.001;最大值：（13.07±0.94）vs（18.09±0.82）,P=0.003]。结论 G250靶向的纳米微泡可在体外能够特异性的结合G250表达阳性的肾细胞癌细胞,在动物体内能够明显的增强移植瘤的超声显影效果。