编号：YYHY007921

篇名：抗CEACAM5纳米抗体在大肠杆菌中的高效周质表达

作者： 王准 陈玉娟 谢英林 陈泉 宋水燕 朱晓宇 敬媛媛 周宇杭 李飞 咸漠 冯东晓 年锐 宋海鹏

关键词： 癌胚抗原 纳米抗体 大肠杆菌 周质表达

机构： 长春理工大学生命科学技术学院 吉林亚泰生物药业股份有限公司 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 长春力太生物技术有限公司

摘要： 纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达。大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低。以pET22b和pMES4为载体构建了两种重组表达质粒,并且比较了他们在不同宿主菌中表达纳米抗体的情况。结果表明,以pMES4为载体的大肠杆菌能够在周质中可溶性表达纳米抗体,而以pET22b为载体的大肠杆菌表达的纳米抗体无法分泌到周质空间中。随后,通过IPTG浓度优化及5L发酵罐过程,控制实现了纳米抗体在大肠杆菌周质中的表达量达到308.32mg/L。研究提供了一种高效表达纳米抗体的方法,为纳米抗体的规模化制备奠定了技术基础。