编号：YYHY00906

篇名：NO缓释纳米粒子PEG-b-PAASNO对肺动脉平滑肌细胞的影响

作者： 周晓 姜大伟 杜强 张春 瞿天宇 李昭玑 章锐锋

关键词： 肺动脉高压 纳米 一氧化氮 聚合物 肺动脉平滑肌细胞 大鼠

机构： 东南大学附属中大医院呼吸与危重症医学科 中国科学院大学温州研究所

摘要： 目的:探讨一氧化氮(NO)供体聚合物胶束PEG-b-PAASNO(PSNO)对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的影响。方法:构建PSNO并检测体外释放NO水平。分离并培养大鼠PASMC,CCK8确定PSNO安全浓度范围和有效作用浓度。设立空白对照组、PSNO(250 ng·mL-1)组(PSNO组)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB,15 ng·mL-1)组(BB组)和PDGF-BB+PSNO(15 ng·mL-1PDGF-BB+250 ng·mL-1PSNO)组(BB+PSNO组),用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EDU)实验、划痕实验和Transwell实验评估PSNO对PASMC增殖、迁移能力的影响,免疫印迹法评估PASMC增殖、收缩、细胞周期相关蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、钙调蛋白(calponin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)]的表达水平。组间比较采用one-way ANOVA分析。结果:成功构建稳定释放NO的纳米聚合物胶束PSNO,连续释放NO超过48 h,效应呈时间-剂量依赖性。PSNO质量浓度为250 ng·mL-1时有效抑制PDGF-BB诱导的PASMC增殖、迁移;与BB组相比,BB+PSNO组PCNA、calponin、α-SMA、cyclin D1和CDK2蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建一种可以稳定释放NO的纳米聚合物胶束PSNO,其有效释放NO超48 h,功能上阻滞PASMC增殖、迁移,并降低PASMC收缩、细胞周期相关蛋白表达水平。