目的：本研究采用靶向CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶Cε（protein kinase Cε,PKCε）小干扰RNA基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法：制作可靶向CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞CD147表达量。分别设立CP组、CN组和LP组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng进行细胞转染。另设CD147靶向载体对照CA组和未转染细胞的对照（control）组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR检测PKCε的mRNA表达。Western blot法检测PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和GAPDH的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。Transwell法检测细胞的迁移能力。结果：免疫荧光法染色观察证实,人肺癌A549细胞的胞膜高表达CD147蛋白。CP组细胞中siRNA高效进入A549细胞,质粒内吞效率大于CN组和LP组。CP组、CN组、LP组和CA组的A549细胞中PKCε的mRNA相对表达量分别为control组的（9.76±0.18）%、（98.51±0.32）%、（99.17±0.16）%和（99.68±0.11）%,CP组与control组间的差异有统计学显著性（P〈0.05）,CN组、LP组与control组间的差异无统计学显著性。CP组PKCε、Ki-67、MMP3及Wnt1蛋白的表达量明显降低,CN组和LP组与对照组之间的蛋白表达量的差异无统计学显著性。CP组的克隆形成数量明显少于control组,差异具有统计学显著性（P〈0.05）。CN组、LP组和CA组的有效克隆数量与control组相比差异没有统计学显著性。CP组的过膜细胞数量明显少于control组,差异具有统计学显著性（P〈0.05）。CN组、LP组和CA组的数量与control组相比差异没有统计学显著性。结论：靶向CD147修饰的纳米基因载体,可以对肺癌细胞进行高效的PKCε-siRNA基因治疗,实现对肺癌细胞增殖和迁移能力的高效抑制。...
应用
目的：制备壳聚糖修饰的丹皮酚聚乙二醇-（聚乳酸-羟基乙酸共聚物）（PEG-PLGA）纳米粒,对其体外性质进行表征,考察纳米粒的体外释药性能,为丹皮酚的新型纳米制剂研究提供参考。方法：以PEG-PLGA为载体材料,壳聚糖为表面修饰剂,采用纳米沉淀法制备了壳聚糖修饰的丹皮酚PEG-PLGA纳米粒,利用正交试验优化处方工艺,并对其体外性质进行表征。以p H 7.4磷酸盐缓冲液为释放介质,考察壳聚糖修饰的丹皮酚PEG-PLGA纳米粒的体外释药行为。结果：载药纳米粒经壳聚糖修饰后,Zeta电位由负电荷转为正电荷且更加稳定,粒径略有增加。制备出的纳米粒外观呈球形,平均粒径和Zeta电位分别为（96.6±3.2）nm,（30.61±0.34）m V,载药量及包封率分别为10.87%和79.37%。体外释药试验表明载药纳米粒24 h的累计释放率62.4%。结论：按优选的处方成功制备了壳聚糖修饰的丹皮酚PEG-PLGA纳米粒,该制剂的体外性质良好且具有一定的缓释特性。...
应用
目的以人血清白蛋白为载体制备藤黄酸白蛋白纳米粒,对处方和工艺进行优化,并进行稳定性考察。方法采用新型白蛋白纳米制备技术(NabTM)制备藤黄酸白蛋白纳米粒（GA-HSA NPs）,用透射电镜观察纳米粒的形态,用Nicomp TM PSS 380进行粒度仪测定其粒度分布及电位,超速离心法测定其包封率、载药率及过膜效率,并考察其稀释稳定性及储存稳定性。结果 GA-HSA NPs电镜下呈球状粒子,粒径为（103.2±34.4）nm,zeta电位为-25.10 mV,GA-HSA NPs具有较高的包封率、载药率和过膜效率。GA-HSA NPs冻干粉针储存12个月期间无塌陷或皱缩,GA-HSA NPs混悬液在储存6周内粒径无显著性变化。结论难溶性抗癌药物藤黄酸可以采用NabTM制备成白蛋白纳米粒,其粒径小,稳定性高,有望成为藤黄酸的新型给药系统。...
目的 ：探讨直径5 nm的小尺寸金纳米颗粒（gold nanoparticles,GNPs）对大鼠皮质神经元细胞的作用及相关机制。方法：使用硼氢化钠还原法制备GNPs,用透射电镜（TEM）及紫外-可见光光谱（UV-Vis）进行鉴定。用5%牛血清白蛋白（BSA）对GNPs进行包裹提纯后制备成不同浓度（600、1 200、2 400μg/L）的GNPs培养液。采用免疫荧光染色鉴定原代培养的大鼠皮质神经元纯度。体外培养原代大鼠皮质神经元72 h后,以正常培养的神经元为对照组,以不同浓度GNPs溶液孵育48 h后的神经元作为实验组。采用TEM观察GNPs在细胞内的分布;采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;采用TUNEL法检测细胞凋亡;采用丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒检测氧化应激水平。结果：TEM及UV-Vis显示硼氢化钠还原法制备的GNPs呈尺寸均一的球形,在溶液中均匀分散。原代培养的大鼠皮质神经元纯度为（82.0±2.3）%。GNPs主要以聚合体形式分布于胞浆、溶酶体、囊泡中。随着GNPs浓度的增高,细胞活性逐渐降低,尤其1 200和2 400μg/L处理组细胞活力较对照组显著降低（P〈0.05）。TUNEL染色结果显示,随着GNPs浓度的增高,凋亡细胞数逐渐增加,1 200和2 400μg/L处理组细胞凋亡明显,具有显著性差异（P〈0.05）。随着GNPs浓度的增高,细胞内MDA含量逐渐增加,SOD含量逐渐减少,1 200和2 400μg/L处理组与对照组相比MDA含量显著升高,SOD含量显著降低（P〈0.05）。结论：5 nm GNPs能降低大鼠皮质神经元的细胞活力,促进其凋亡,其机制可能与氧化应激损伤相关。...
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目的 探讨不同时间乳晕区皮下注射钠米炭混悬液对乳腺癌腋窝淋巴结的示踪效果。方法 150例乳腺癌患者按入院日期随机分为术前1d给药组、麻醉诱导后给药组、不给药对照组各50例,比较3组患者腋窝淋巴结检获及术后并发症、复发转移情况。结果 术前1天给药组与麻醉诱导后给药组腋窝淋巴结检获均数、黑染率、转移淋巴结检获率、≤2mm淋巴结检获率差异无统计学意义（P〉0.05）,但二者腋窝淋巴结检获均数、转移淋巴结检获率、≤2mm淋巴结检获率均明显高于不给药对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。随访8~26个月三组术后并发症差异无统计学意义（P〉0.05）,均未出现复发转移。结论 与术前1d给药比较,麻醉诱导后于乳晕区皮下注射纳米炭,腋窝淋巴结检获情况相近,同样能够确保病理分期的准确性,又具有无痛的优点,不增加患者术后并发症,值得临床推广。...
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