应用
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目的观察高效解硅菌株代谢产物对中国仓鼠肺细胞在二氧化硅暴露下的保护作用。方法采集土壤、沙石标本,分离纯化其中的硅酸盐细菌;用液体培养基对高效解硅菌株进行培养,收集培养细菌12 d后的原液并过滤,滤液作为硅酸盐细菌代谢产物。取对数生长期的中国仓鼠肺细胞(CHL),用胰酶消化后制成细胞悬液加入2个96孔培养板中培养。分为对照组、二氧化硅暴露组、硅酸盐细菌代谢产物组(根据不同菌株的产物,分为I、II 2个亚组);二氧化硅+硅酸盐细菌代谢产物组(根据不同菌株的产物,分为I、II 2个亚组)。对照组正常培养;二氧化硅暴露组仅在正常培养时加入二氧化硅粉尘;硅酸盐细菌代谢产物组正常培养时加入硅酸盐细菌代谢产物;二氧化硅+硅酸盐细菌代谢产物组,在正常培养时加入二氧化硅粉尘后再加入硅酸盐细菌代谢产物;于给药24 h后采用4一甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活情况。结果与二氧化硅暴露组比较,硅酸盐细菌代谢产物提取液I与SiO2体积比在3/7~9/1(硅酸盐细菌代谢产物提取液I剂量为30~90μl)时,吸光度(OD)值显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);硅酸盐细菌代谢产物提取液II与SiO2体积比在2/8~9/1(硅酸盐细菌代谢产物提取液II剂量为20~90μl)时,OD值显著增加(P<0.01),且在20~50范围内,随菌液II体积增大,OD值递增,50~90范围内,随菌液II体积增大,OD值递减。结论硅酸盐细菌代谢产物对暴露于二氧化硅的CHL细胞有保护作用,并呈剂量依赖关系,且存在最佳保护作用的剂量范围。...
应用
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利用异喹啉类生物碱小分子化合物与腺嘌呤(A碱基)在酸性条件结合力下降的特点,以具有良好生物相容性、DNA酶切保护性以及易于生物修饰的二氧化硅纳米颗粒为载体,发展了一种基于聚A链(Poly(A))/二氧化硅纳米颗粒(Poly(A)/SiNPs)的pH可控释放抗肿瘤药物体系.在该体系中,选择了甲氧檗因(coralyne)作为药物模式分子,通过共价修饰方法在二氧化硅纳米颗粒表面修饰Poly(A),获得Poly(A)/SiNPs颗粒,通过A碱基-甲氧檗因-A碱基结合方式构建了甲氧檗因载药体系.采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜以及荧光光谱等方法对载药体系进行了表征,考察了载药体系的稳定性和在不同pH缓冲液中的释放情况,并采用激光共聚焦成像技术和MTT方法分别考察了该体系在Hela细胞内的定位以及杀伤效果.结果表明:Poly(A)被成功修饰在二氧化硅纳米颗粒上后能很好地与甲氧檗因结合,构建甲氧檗因载药体系,该体系在中性条件具有较好的稳定性,而在酸性条件下(pH<6),由于甲氧檗因与A碱基的结合力减弱而被释放出来,实现pH的控制释放.细胞成像结果显示,该载药体系能被细胞内吞并聚集于溶酶体内,通过利用溶酶体的酸性环境释放药物,实现了对肿瘤细胞的杀伤.该体系较好地实现了甲氧檗因抗肿瘤药物的装载和释放,为发展这一类抗肿瘤药物的载体提供了新方法. ...
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