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本研究旨在探讨石墨烯通过核因子κBp65(NF-κBp65)信号通路促进肾小球足细胞上皮间质转分化(EMT)的机制。方法如下:(1)体外培养足细胞经0、10、20、40mg/L石墨烯刺激24h,实时定量PCR及Western印迹法检测EMT相关上皮表型蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin及间质表型蛋白α-SMA、Desmin的mRNA及蛋白表达,Western印迹法检测信号通路蛋白NF-κBp65表达;(2)在20mg/L石墨烯中加入NF-κB特异性抑制剂BAY11-7082后,实时定量PCR及Western印迹检测EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin及α-SMA、Desmin mRNA及蛋白表达,免疫荧光染色法观察各浓度石墨烯刺激下Nephrin和α-SMA等足细胞EMT相关表型蛋白的变化。结果发现,与对照组相比,不同石墨烯浓度刺激下NF-κBp65蛋白表达升高,EMT相关蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin表达量下降,α-SMA、Desmin蛋白表达量升高,上述蛋白的mRNA表达变化与其蛋白表达一致;与20 mg/L石墨烯组相比,使用NF-κBp65信号通路特异性抑制剂BAY11-7082后EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA、Desmin蛋白表达下降,上述蛋白的mRNA表达变化与其蛋白表达一致。作者认为,石墨烯经NF-κBp65信号通路促进肾小球足细胞EMT,抑制NF-κB信号通路能够抑制足细胞EMT。...
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将干冰用于氧化石墨烯(GO)/白炭黑/天然胶乳(NRL)的混合乳液中,利用干冰气化产生的大量气泡破裂而形成的能量对填料聚集体的破碎作用,提高填料在NRL中的分散性,研究干冰用量对GO/白炭黑/天然橡胶(NR)复合材料性能的影响。结果表明:干冰用量较小时,随着干冰用量的增大,复合材料的Payne效应减弱,交联密度增大,物理性能提高,滚动阻力降低;干冰用量较大时,复合材料的Payne效应增强,交联密度减小,物理性能下降,滚动阻力提高;干冰用量为20份时,复合材料的物理性能最佳。...
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将玻碳电极(GCE)打磨至呈镜面,在其表面上滴加氮掺杂石墨烯悬浮液5.0μL,在50℃的红外灯下烘干,制得氮掺杂石墨烯修饰的GCE;然后取5.0μmol·L^-1发夹DNA(H DNA)溶液10μL滴涂于氮掺杂石墨烯修饰电极表面,制得氮掺杂石墨烯和H DNA修饰的GCE。用此修饰电极作为工作电极,用差分脉冲伏安法(DPV)测定人体血清中多巴胺(DA)的含量。试验表明:氮掺杂石墨烯和H DNA修饰的电极对DA的电化学氧化具有更好的电催化作用。DA在此修饰电极上的氧化峰电流与其浓度在4.0×10^-7~6.0×10^-5 mol·L^-1内呈线性关系,检出限(3s/k)为6.6×10^-8 mol·L^-1。测定时用pH6.5磷酸盐缓冲溶液(PBS)作为支持电解质。分析血清样品时前处理如下:取血清样品2.0mL,加入甲醇4.0mL,离心沉淀。取上清液2.0mL,加入等体积的pH6.5PBS,充分混匀后供测定。用pH6.5的PBS配制DA标准溶液系列,利用DPV对DA标准溶液系列进行测定,记录其氧化峰电流值,制作工作曲线。应用此方法分析了人体血清样品并以此样品为基体进行加标回收试验,测得回收率在90.0%~110%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.7%~3.7%之间。...
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ATF-7是具有亮氨酸拉链结构的转录激活因子,为了解其是否参与调控氧化石墨烯(GO)的致毒效应,以秀丽线虫为在体研究模型,通过运动行为、肠道活性氧簇(ROS)水平和寿命分析,评价atf-7 RNA干扰对秀丽线虫应答GO毒效应的影响;同时以qRT-PCR和Patf-7::mCherry转基因秀丽线虫检测GO对atf-7表达水平的影响.结果显示,GO暴露可以降低秀丽线虫头部摆动和身体弯曲频率,且运动行为的下降与GO暴露浓度呈正相关;atf-7干扰秀丽线虫对GO致毒效应更加敏感,0.1 mg/L GO就可导致头部摆动和身体弯曲频率显著下降(P < 0.01);在GO暴露条件下,atf-7干扰秀丽线虫的平均寿命由13.54 d缩短到8.8 d,寿命缩短程度大于空载干扰组(P < 0.01);atf-7干扰秀丽线虫在GO暴露条件下肠道ROS水平比未暴露情况下上升了3.33倍,而空载组肠道ROS水平上升了2.66倍,atf-7干扰秀丽线虫对GO所致肠道ROS的积累更加明显(P < 0.01). GO暴露可以诱导秀丽线虫atf-7的表达水平,GO暴露组atf-7在转录水平和蛋白水平较对照组分别上调了164倍和200倍.因此,atf-7是秀丽线虫应对GO致毒效应中所必需的,秀丽线虫通过上调atf-7的表达以应对GO毒效应,对秀丽线虫进行atf-7干扰降低其表达水平可使秀丽线虫对GO致毒效应更加敏感....
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