应用
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本研究以设计的与16SrRNA互补的单链DNA(ssDNA)探针作为捕捉探针,羧基荧光素(FAM)标记的探针1、探针2作为信号探针,将两者组装形成两个FAM标记的探针(TFP),并以氧化石墨烯(GO)作为猝灭剂形成TFP/GO复合物。当无靶标时,TFP吸附到GO表面,FAM的荧光被猝灭,当加入靶标后,TFP从GO上解离下来,荧光恢复,因此可以通过荧光值定量检测靶标。此外,在体系中加入脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ),TFP被降解从而释放出靶标RNA用于下一轮反应同时产生大量的FAM,可以极大地提高该传感器的灵敏度及特异性。结果表明该方法对靶标RNA的检测限可达0.3nmol/L,且在1~60nmol/L范围内呈良好的线性关系(R2=0.9984);对靶标菌的检测限低至50CFU/mL,且在102~107 CFU/mL范围内呈良好的线性关系(R2=0.9973)。该方法对靶标菌检测的信噪比要远大于非靶标菌,表明其具有很强的特异性。该研究建立的快速检测金黄色葡萄球菌的纳米生物传感器具有良好的定量能力和操作性能,且灵敏度高、特异性强。...
目的通过测试氧化石墨烯-壳聚糖复合膜的抗拉强度及其对人牙龈成纤维细胞增殖的影响,探讨其作为新型引导骨组织再生膜的可行性。方法将氧化石墨烯(graphene oxide,GO)溶液与壳聚糖溶液按比例混合,超声破碎分散,通过自蒸发方法成膜,制备GO占壳聚糖的质量分数分别为0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、6.0%、8.0%的复合膜和纯壳聚糖膜。采用力学万能实验机测试各组膜试件(每组样本量为6)抗拉强度。取抗拉强度最大的复合膜组膜试件,用扫描电镜和透射电镜察微观结构,X射线衍射仪分析成分。取抗拉强度最大的复合膜组,重新制备试件浸泡于氢氧化钠溶液中进行去酸处理后测试抗拉强度。从安徽医科大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科收集拔除的阻生牙上残留的牙龈组织,原代培养人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGF),培养至第2代,通过免疫细胞化学法染色进行细胞鉴定,用细胞计数试剂盒检测空白对照组、壳聚糖膜组和抗拉强度最大的复合膜组(每组样本量为5)与HGF共培养24、48h的细胞计数。结果加入GO后复合膜的截面呈有序的层状结构,X射线衍射分析显示复合膜中存在GO。复合膜抗拉强度随GO比例增加而增加,GO占壳聚糖的质量分数为4.0%时抗拉强度最大,达(134.8±7.3)MPa,此组复合膜去酸处理后抗拉强度为(144.6±8.1)MPa。培养24和48h时壳聚糖膜组、复合膜组HGF数量与空白对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论GO占壳聚糖的质量分数为4.0%时复合膜抗拉强度最大,且细胞相容性良好。...
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