应用
目的:建立p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒靶向基因治疗和磁流体热疗系统用于肝癌的联合治疗,以提高治疗的安全性和有效性。方法:亚克隆基因重组法构建靶向肝癌的治疗基因p[5HRE]AFPp-p53,并用限制性内切酶凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功;用共沉淀法制备磁性纳米颗粒PEI-Fe_3O_4,利用透射电镜、粒径仪、傅里叶转换红外光谱仪等对PEI-Fe_3O_4进行表征检测。MTT法检测PEI-Fe_3O_4转染p[HRE]AFPp-p53至不同细胞系后的细胞增殖及磁流体热疗和基因治疗联合作用对肝癌细胞Hep G2的增值抑制作用。结果:成功制备载有靶向治疗基因的p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒,由其介导的基因治疗组与阴性及纳米颗粒对照组相比,明显抑制肝癌Hep G2(AFP阳性)细胞[(0.592±0.041)vs(1.052±0.031)、(1.012±0.021),P〈0.01]和SMMC7721(AFP阴性)细胞(0.813±0.042)vs(1.073±0.032)、(1.182±0.052),P〈0.01]的增殖活性,但对非肝癌细胞(L929和Lovo)增殖抑制作用无明显影响(P〉0.05)。基因治疗和磁流体热疗联合组与单独使用热疗组及基因治疗组相比显著增加Hep G2细胞的增殖抑制率(76.11%vs 35.22%、42.92%,均P〈0.01)。结论:p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒对肝癌细胞具有特异性杀伤作用,并且能与磁流体热疗产生协同效应,是一种选择性高、治疗效果好的肿瘤治疗方法。...

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2018-09-07

应用
目的以酸敏感阿霉素前药纳米粒为基础,通过负载姜黄素构建联合递送系统,从而在提高抗肿瘤细胞增殖效果的同时降低由阿霉素引起的心肌细胞毒性。方法利用阿霉素(doxorubicin,DOX)的氨基与醛基化聚乙二醇(PEG-CHO)的醛基进行席夫碱反应得到PEG-DOX前药聚合物,通过疏水作用将疏水性抗肿瘤药物姜黄素(curcumin,Cur)负载到PEG-DOX的疏水内核中,最后通过纳米沉淀技术得到同时负载两种药物的前药纳米粒PEG-DOX/Cur NPs。通过核磁(1H-NMR)对PEG-DOX前药进行结构表征,利用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)对PEG-DOX/Cur NPs的粒径和形貌进行表征;利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)研究PEG-DOX/Cur NPs在酸性条件下的药物释放行为;利用MTT法研究PEG-DOX/Cur NPs的肿瘤细胞(H1975)增殖抑制效果以及评价PEG-DOX/Cur NPs对心肌细胞(H2C9)的毒性;通过H2C9细胞内的氧化自由基(ROS)水平检测(2',7'-二氯荧光素二乙酸盐法,DCFH-DA法)揭示PEG-DOX/Cur NPs对DOX心肌细胞毒性改善的机理。结果 PEG-DOX/Cur NPs为直径约90 nm的均一的球形结构,在酸性条件下能够同步释放DOX和Cur;MTT结果表明PEG-DOX/Cur NPs的H1975细胞增殖抑制效果优于DOX和PEG-DOX NPs(P〈0.05),且PEG-DOX/Cur NPs对H2C9细胞的毒性明显低于DOX和PEG-DOX NPs(P〈0.05);H2C9细胞ROS含量检测结果表明PEG-DOX/Cur NPs处理的心肌细胞具有最低的ROS水平(P〈0.05),由此说明PEG-DOX/Cur NPs较低的心肌细胞毒性可能源于Cur引起的胞内ROS的降低所致。结论基于DOX前药纳米粒负载Cur构建联合递送系统在实现了理想的肿瘤细胞增殖抑制效果的同时,明显的降低了由DOX引起的心肌细胞毒性,实现了联合治疗的效益最大化。...

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2018-09-05

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